质谱鉴定实验流程(胶内酶解或溶液内酶解)
1:胶内酶解
2:溶液内酶解
使用仪器
Thermo Scientific Q Exactive (高分辨质谱)
技术优势
适合中度复杂的蛋白质样品, 如相互作用的蛋白质条带和洗脱液; 高准确性, 高灵敏度。
实验报告内容
1、相互作用蛋白质谱鉴定结果(excel 列表);
2、完整的实验步骤、使用仪器、试剂来源、软件检索参数等。
蛋白样品送样要求
样品 | 样品要求 |
SDS-PAGE条带 | 考染,条带清晰可见 |
蛋白质溶液 | 蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl; 说明裂解液和洗脱液成分,浓度信息 |
实验样本预处理及运输注意事项
为保证高质量的技术服务结果,请您参照以下说明对实验样本进行处理和保存:
⊙蛋白洗脱液:定量并计算总蛋白量,真空干燥后,密封好管口,冰袋包装寄送。
⊙蛋白质条带(考染):从凝胶上割取条带时,避免污染,将条带放入EP管内,密封好管口,冰袋包装寄送。
特别提醒:快递寄送样本运输过程中,可能晃动幅度会比较大,请做好基本运输防护措施。
注:在寄送样本时,请填写好样本登记表,随样本一同寄往本公司。
参考文献:
Jayantha Gunaratne, et al. (2011) Protein Interactions of Phosphatase and Tensin Homologue (PTEN) and Its Cancer-associated G20E Mutant Compared by Using Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture-based Parallel Affinity Purification. JBC, VOL. 286, NO. 20, pp. 18093–18103
Cezary Waszczak, et al. (2014) Sulfenome mining in Arabidopsis thaliana. PNAS, vol. 111, no. 31, 11545–11550